Brucella nga antibody Elisa Kit .

Espesipikasion .

 

Dagiti pamay-an ti panagsubok & panangipatarus .

 

Addang 1 Pamay-an ti Panangsubok .

1.1 Panagisagana ti solusion ti panagbuggo .

WKonsentrasion ti orking . wAshing a likido:Sakbay nga usaren, ti solusion ti panagbuggo ket rumbeng a maisubli iti temperatura ti kuarto (20-25℃) ken maiyugyugyog a nasayaat tapno agpapada dayta. Kalpasanna, pabassiten ti 20 a daras ti concentrated wash solution iti nadalus a danum (kas pagarigan, ti 5ml concentrated washing solution ket mainayon iti 95ml a nadalus a danum), ilaok a nasayaat, ken ti nabartek a washing liquid ket mabalin a maidulin iti 2-8℃iti 7 nga aldaw.

1.2 Panagisagana ti Sample .

1 Naala ti Whole Animal Blood, nasentripugo iti 4000rpm iti 10 a minuto, ken naurnong ti supernatant. Mabalin met a natural a ma-coagulate ti serum no awan ti hemolysis.

2No dakkel ti kadakkel ti sample, tapno masigurado a maitunos ti panawen ti eksperimento a reaksion. Paglalaoken ti serum sample iti antibody working solution iti 1:1 iti dilution plate (70ul serum sample + 70UL antibody working solution).Ti negatibo a kontrol ken positibo a kontrol ket isu met laeng ti serum sample.

1.3 Pamay-an ti Panangsubok .

1 Alaen ti enzyme label a microplate (sigun iti bilang dagiti sample, mabalin a ma-disassemble ken mausar iti sumagmamano a daras), mangiset-up iti dua a bubon tunggal maysa para kadagiti negatibo ken positibo a kontrol, inayon ti 100ul ti ti ti premixed mixture iti enzyme label microplate. Siaannad nga iyugyugyog ti sample iti bubon, nga usaren ti sealing plate film a mangabbong iti plato, ken ag-incubate iti 37℃iti 30 a minuto.

2 Open the sealing plate film, yugyogen ti solusion iti plato a bubon, inayon ti 300μl ti working concentration washing liquid iti tunggal bubon, ken kalpasanna ibelleng ti likido iti bubon. Uliten dagiti addang iti ngato iti 5 a daras, ken kamaudiananna pat dry iti nadalus nga absorbent paper.

③DIluted nga enzyme conjugate .:Pabunuen ti enzyme conjugate (50×) 50 a daras (kas pagarigan: 20ul enzyme conjugate concentrate + 980UL diluent 1, ti espesipiko a kaadu a kasapulan ket nakuenta segun iti bilang dagiti pagsubok a sample), ilaok a nasayaat ken ipaigid.

1Inayon ti 100μl nga enzyme conjugate iti tunggal bubon, abbongan ti plato, ken i-incubate iti 37℃iti 30 a minuto.

5washing enzyme plate, ti espesipiko nga operasion ket isu met laeng ti adda iti ngato 2.

3Add 100μl Substrate Solution iti tunggal bubon, kaluban ti plato ken i-incubate iti 10 a minuto iti 37℃ti kaadayona manipud iti lawag.

1Inayon ti 50μl STOP solution iti tunggal bubon, ken ikeddeng ti resulta iti uneg ti 5 a minuto.

 

Addang 2 Panangipatarus ti resulta .

 

Ti pateg ti OD450 ti tunggal bubon ket nabasa iti 96-well microplate reader.

2.1 Panangipaneknek .

 

Ti promedio nga OD450NM a pateg ti positibo a kontrol ket < 0.35 ken ti promedio nga OD450NM a pateg ti negatibo a kontrol/positibo a panagtengngel ket dakdakkel wenno kapada ti 3.5, dagiti resulta ti eksperimento ket balido. Ta no saan, maulit koma ti test.

2.2 Pamay-an ti panagkuenta .

Para iti tunggal sample, kalkulaen ti PI (blockingr ate) kas iti sumaganad babaen ti panangusar kadagiti nailinteg a sample ken control values:

2.3 Panangipatarus ti resulta .

No ti PI < 20%, daytoy ket maikeddeng a kas negatibo.

No ti PI > 30%, daytoy ket maikeddeng a kas positibo.

No 20% a basbassit wenno kapada ti PI a basbassit ngem wenno kapada ti 30%, daytoy ket maikeddeng a kas mapagduaduaan, ken mangisingasing nga uliten ti panagala ti sample ken panagsubok kalpasan ti makalawas.

Dagiti napudot nga etiketa .: Brucella antibody Elisa Kit, Tsina Brucella Antibody Elisa Kit Supplier, Manufacturers, Pabrika